產品詳情
簡單介紹:
Sure
詳情介紹:
感受態細胞基本信息
出品公司: | Stratagene |
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感受態細胞名稱: | Sure感受態細胞 |
菌株類型: | E.coli |
產品目錄號: | 200238 |
培養基: | LB培養基 |
生長條件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: |
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抗性: | 卡那,四環素 |
質粒轉化條件: | 42 ℃熱激 |
應用: | 克隆菌株 |
誘導方法: | -- |
菌株特點: |
SURE(Stop Unwanted Rearrangement Events)感受態細胞是設計用來克隆在傳統菌株中無法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態菌株缺乏催化重組和刪除非標準二級結構和三級結構, 例如十字形(由反向重復序列導致)和Z字形的DNA序列的組件。這些非標準二級結構和三級結構在真核細胞中經常出現,而且這些結構能夠阻礙真核細胞DNA 在傳統菌株中的克隆。sure感受態細胞是限制性內切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-),核酸內切酶(endA)缺陷,和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時sure感受態細胞中所具有的F´ 游離基因上面的lacIqZΔM15基因,使得能夠利用藍白斑進行克隆篩選。 SURE感受態細胞主要是用來克隆不穩定DNA結構, 大腸桿菌DNA修復系統會針對重復序列、二級結構(如Z-DNA)等真核DNA進行重排或刪除修飾。SURE感受態細胞針對uvrC,umuC,SbcC 和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進行突變,提高了真核來源、不規則DNA的穩定性達20倍以上,并且適合克隆甲基化DNA。 本身具有Kana和Tet抗性。當轉化氯霉素抗性質粒到sure感受態細胞中時,一定要用100 ug/ml的氯霉素平板去篩選。因為sure感受態細胞在40ug/ul的氯霉素條件下具有抗性,而對于100ug/ul的氯霉素抗生素具有敏感性。 sure感受態細胞可以用于藍白斑篩選,具有laz互補基因。 在載體構建過程中,我們經常會遇到一些基因片段具有高度的重復,這導致插入載體中的序列可能會在細菌擴增中不穩定,在質粒擴增中產生形成片段的缺失和重排,如發現插入片段高頻率地產生缺失和重排,可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株,例如sure感受態細胞。 |